試驗(yàn)設(shè)計(jì) 實(shí)驗(yàn)樣品：自制益生菌沖劑，主要原料為復(fù)合乳酸菌粉（嗜酸乳桿菌+乳雙歧桿菌+低聚木糖，具體比例：嗜酸乳桿菌23%、乳雙歧桿菌2%，其余為稀釋劑）和低聚木糖，1.5g/袋的鋁箔袋裝，推薦食用方法為每天1次，每次1袋，溫開(kāi)水沖飲。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：選用SPF級(jí)昆明種雌性小白鼠48只，6~8周齡（體重為18~22 g）。 劑量與分組：實(shí)驗(yàn)按人體每日推薦量（以兒童體重30 kg計(jì)，推薦量為0.05 g/kg·BW）的5倍（0.25 g/kg·BW）、10倍（0.5 g/kg·BW）和30倍（1.5 g/kg·BW）分成對(duì)照組和低、中、高劑量組。 灌胃方法及試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)時(shí)分別稱取樣品0.50、1.00、3.00 g，用純凈水配制成20 mL的樣液，分別供低、中、高三個(gè)劑量組動(dòng)物灌胃使用，將小鼠在實(shí)驗(yàn)室條件下適應(yīng)三天后，隨機(jī)將48只鼠分為四組，每組12只，每日灌胃給予受試物，給樣量根據(jù)每周體重增減調(diào)整，連續(xù)灌胃四周，對(duì)照組灌服無(wú)菌純凈水。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束前的第4天免疫動(dòng)物進(jìn)行小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)（足跖厚度增加法）、ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)（MTT法）和NK細(xì)胞活性測(cè)定（LDH法）。
試驗(yàn)結(jié)果 （1）益生菌沖劑對(duì)小鼠體重的影響 由表1和表2可知，各劑量組各期體重與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)期體重比較，差異均無(wú)顯著性意義，表明益生菌沖劑對(duì)小鼠的體重生長(zhǎng)無(wú)明顯影響。
（2）益生菌沖劑對(duì)小鼠脾臟重量和胸腺重量的影響 由表3可知，各劑量組臟器/體重比值與對(duì)照組比較，差異均無(wú)顯著性意義，表明益生菌沖劑對(duì)小鼠的脾臟重量和胸腺重量無(wú)明顯影響。
（3）益生菌沖劑對(duì)小鼠免疫力的影響 益生菌沖劑對(duì)小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響：由表4可知，綿羊紅細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)（足跖增厚法），其高劑量組足跖增厚值與對(duì)照組比較，差異有顯著性意義。
益生菌沖劑對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)的影響：由表5可知，對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)，其高劑量組光密度差值高于對(duì)照組，差異有顯著性意義，益生菌沖劑的脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，表明受試樣品具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能作用。
益生菌沖劑對(duì)受試動(dòng)物NK細(xì)胞活性的影響：由表6可知，中、高劑量組的NK細(xì)胞活性高于對(duì)照組，差異均有顯著性意義，益生菌沖劑對(duì)受試動(dòng)物NK細(xì)胞活性試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，表明受試樣品具有增強(qiáng)NK細(xì)胞活性作用。
試驗(yàn)結(jié)論 本文為研究復(fù)合乳酸菌粉（（嗜酸乳桿菌+乳雙歧桿菌+低聚木糖）的益生菌沖劑在增強(qiáng)兒童免疫力方面的作用，采用了《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003版）之“增強(qiáng)免疫力功能檢驗(yàn)方法”，即對(duì)SPF級(jí)昆明種小鼠經(jīng)口每日分別給予該復(fù)合益生菌產(chǎn)品0.25、0.50、1.50 g/kg·BW，相當(dāng)于人推薦日服量的5、10、30倍共4周，結(jié)果表明綿羊紅細(xì)胞誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)和ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化增殖試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性，說(shuō)明該樣品具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能作用(P<0.05)；同時(shí)受試動(dòng)物NK細(xì)胞活性試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性，說(shuō)明該樣品具有顯著增強(qiáng)NK細(xì)胞活性作用(P<0.01)，以上結(jié)果表明攝入該復(fù)合益生菌粉沖劑產(chǎn)品具有增強(qiáng)免疫力的功能作用。
參考資料： 朱韶娟,張立彥.復(fù)合乳酸菌粉沖劑增強(qiáng)免疫力作用的研究[J].現(xiàn)代食品科技,2013,29(01):77-80+145. |
