試驗(yàn)設(shè)計

試驗(yàn)材料：變異鏈球菌BNCC186308；蔗糖培養(yǎng)基；低聚木糖培養(yǎng)基：以低聚木糖代替蔗糖添加到培養(yǎng)基中，低聚木糖濃度為2%，其余成分同蔗糖培養(yǎng)基；低聚木糖-蔗糖培養(yǎng)基：在蔗糖培養(yǎng)基中添加低聚木糖，使低聚木糖濃度為2%。將上述3種培養(yǎng)基充分溶解后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值至7.6，高壓蒸汽滅菌鍋121℃滅菌20 min。

變異鏈球菌培養(yǎng)和菌懸液的制備：在潔凈工作臺內(nèi)，接種活化后的變異鏈球菌至蔗糖液體培養(yǎng)基內(nèi)，在37℃厭氧培養(yǎng)罐中培養(yǎng)48 h，利用一次性接種環(huán)取少量菌液接種在含蔗糖瓊脂培養(yǎng)基上，在37℃厭氧培養(yǎng)罐中培養(yǎng)48 h，再挑取單個菌落至蔗糖液體培養(yǎng)基內(nèi)，在 37℃厭氧培養(yǎng)罐中培養(yǎng)24 h，在分光光度計上測600 nm處的吸光度為1.3，此菌液即為本實(shí)驗(yàn)所需的工作菌懸液。

變異鏈球菌在3種培養(yǎng)基內(nèi)的生長、產(chǎn)酸情況的比較：取上述3種類型的液體培養(yǎng)基于試管中，每種類型各10支試管，每支試管各移取5 mL液體培養(yǎng)基，每支試管接種0.1 mL 變異鏈球菌菌懸液，在37℃厭氧培養(yǎng)罐中培養(yǎng)24 h，用分光光度計測量OD₍₆₀₀₎值，用pH計測量培養(yǎng)基的pH值。

表1為變異鏈球菌在蔗糖、低聚木糖-蔗糖、低聚木糖3 種液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h 后的OD₍₆₀₀₎值，結(jié)果顯示低聚木糖培養(yǎng)基OD₍₆₀₀₎值明顯低于其他兩種培養(yǎng)基，說明低聚木糖對變異鏈球菌的生長產(chǎn)生抑制作用，低聚木糖-蔗糖培養(yǎng)基的OD₍₆₀₀₎值低于蔗糖培養(yǎng)基，說明低聚木糖對蔗糖培養(yǎng)基中的變異鏈球菌的生長也產(chǎn)生抑制作用。

表2為變異鏈球菌在蔗糖、低聚木糖-蔗糖、低聚木糖液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h后的pH值；pH值即酸度水平，細(xì)菌代謝過程中會產(chǎn)生酸性物質(zhì)，pH值越低代表糖代謝越充分；結(jié)果顯示低聚木糖培養(yǎng)基pH值高于其他兩組，低聚木糖-蔗糖培養(yǎng)基pH值高于蔗糖培養(yǎng)基，說明低聚木糖對變異鏈球菌的生長代謝產(chǎn)生抑制作用，同時低聚木糖對蔗糖培養(yǎng)基中變異鏈球菌的生長也產(chǎn)生抑制作用。

本文對3種培養(yǎng)基中變異鏈球菌的生長和產(chǎn)酸情況進(jìn)行研究，通過模擬口腔環(huán)境厭氧培養(yǎng)24 h后，用分光光度計和pH計分別測定3種培養(yǎng)基中的OD₍₆₀₀₎值和pH值，驗(yàn)證低聚木糖對口腔變異鏈球菌的抗齲齒作用，結(jié)果表明低聚木糖能使變異鏈球菌的生長和產(chǎn)酸受到明顯抑制，低聚木糖-蔗糖培養(yǎng)基也會使變異鏈球菌的生長和產(chǎn)酸能力下降，因此低聚木糖可作為一種新型防齲齒添加劑。

參考資料：