試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選擇40只雄性Wistar大鼠（240-250g）作為研究對(duì)象，將大鼠飼養(yǎng)在環(huán)境控制室（25±2℃）中的不銹鋼絲底籠中，進(jìn)行12h的光照/黑暗循環(huán)，然后采用標(biāo)準(zhǔn)半合成飲食喂養(yǎng)大鼠1周。此外，基礎(chǔ)日糧組成為：21%酪蛋白；10%蔗糖；54%玉米淀粉；10%精制花生油；1%NRC維生素合劑；4%伯恩哈特-托馬雷利鹽。待大鼠適應(yīng)環(huán)境一周后，將其分為5個(gè)組（每組8只）：對(duì)照組，1,2-二甲基肼（DMH）（陽(yáng)性對(duì)照組），XOS（10％），DMH+XOS（5％）和 DMH+XOS（10％），其中DMH組、DMH+XOS（5％）和 DMH+XOS（10％）的大鼠每周通過(guò)腹股溝區(qū)域的皮下注射接受3劑溶于鹽水（0.5ml）的DMH，DMH在第三次給藥后1周開(kāi)始飲食治療，XOS干預(yù)組飼喂含有XOS的日糧45天，而正常對(duì)照組和DMH對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧。實(shí)驗(yàn)期間大鼠可以自由獲取食物和水，且每隔一周給大鼠稱重以及每天記錄飼料攝入量。在實(shí)驗(yàn)期結(jié)束時(shí)，用乙醚麻醉動(dòng)物并通過(guò)斷頭處死，處死后立即切除肝臟和大腸，并用冰冷的鹽水清洗，用于分析盲腸中細(xì)菌、檢測(cè)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶和過(guò)氧化氫酶的活性以及異常隱窩病灶A(yù)CF的分析。
試驗(yàn)結(jié)果 （1）XOS對(duì)體重、盲腸和肝臟重量的影響 如表1所示，與正常對(duì)照組大鼠相比，DMH對(duì)照組的體重增加和盲腸重量明顯較低（P＜0.05），肝臟重量也有所下降。XOS的飲食干預(yù)顯著改善了（P≤0.05）DMH組大鼠的體重和盲腸重量（DMH±5％XOS和DMH±10％XOS），肝臟重量也被日糧中的XOS所逆轉(zhuǎn)。
（2）結(jié)腸內(nèi)容物中的微生物群 如表2所示，與正常對(duì)照組相比，DMH的處理顯著減少了雙歧桿菌的數(shù)量，增加了產(chǎn)氣莢膜梭菌和大腸桿菌的數(shù)量。與正常對(duì)照組和DMH對(duì)照組相比，日糧中添加X(jué)OS導(dǎo)致雙歧桿菌數(shù)量顯著增加（P≤0.05）。與DMH對(duì)照組相比，XOS的補(bǔ)充顯著減少了產(chǎn)氣莢膜梭菌和大腸桿菌的數(shù)量（P≤0.05）。
（3）增殖標(biāo)記：異常隱窩病灶 如圖1所示，與DMH對(duì)照組相比，XOS組的ACF平均大小（以每個(gè)病灶的隱窩數(shù)衡量）顯著降低（P＜0.05）。如表3所示，ACF僅存在于用DMH處理的大鼠的結(jié)腸中，但是XOS補(bǔ)充后，對(duì)于1、2、3和4的隱窩/病灶，隱窩多樣性降低了約50％；且在DMH＋10％XOS組中，ACF明顯減少，3和4的隱窩未顯示隱窩多樣性。
（4）結(jié)腸粘膜和肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化和抗氧化酶活性的變化 如表4所示，與正常對(duì)照組大鼠相比，DMH處理的大鼠結(jié)腸中的脂質(zhì)過(guò)氧化物減少，補(bǔ)充XOS后其水平明顯恢復(fù)至接近正常水平。此外，DMH處理顯著增加了肝臟中的脂質(zhì)過(guò)氧化物水平，但膳食補(bǔ)充XOS后顯著改善；DMH處理后結(jié)腸粘膜和肝臟中谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（GST）和過(guò)氧化氫酶的活性顯著降低，但補(bǔ)充XOS后二者活性顯著升高。
試驗(yàn)結(jié)論 XOS對(duì)DMH誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸癌模型有保護(hù)作用，XOS的干預(yù)顯著增加了有益菌的數(shù)量，減少了ACF的數(shù)量。此外，飲食中的XOS減少了DMH誘導(dǎo)的結(jié)腸組織抗氧化的改變，這有助于發(fā)揮益生元XOS對(duì)結(jié)腸癌的預(yù)防潛力。
參考資料： Ayyappan A. Aacharya, DuraiswamyGobinatha, Krishnapura Srinivasanb,et al. Protective effect ofxylooligosaccharides from corncobon 1,2-dimethylhydrazine induced colon cancerin rats[J]. Bioactive Carbohydratesand Dietary Fibre, 2015, 5(2):146-152. |
